巢式PCR的原理？

巢式PCR（nested PCR），是指利用两套PCR引物（巢式引物）对进行两轮PCR扩增反应。 　　在第一轮扩增中，外引物用以产生扩增产物，此产物在在内引物的存在下进行第二轮扩增。 　　由于巢式PCR反应有两次PCR扩增，从而降低了扩增多个靶位点的可能性（因为与两套引物都互补的引物很少）增加了检测的敏感性；又有两对PCR引物与检测模板的配对，增加了检测的可靠性。 　　一般应用于动物方面。如：病毒，梅毒螺旋体，HIV，肿瘤基因等 　　巢式PCR，可以在10的六次方基因组背景下检测到一个拷贝的病毒基因，也不像二次PCR容易产生成片的产物，是效果最好的PCR，但也因此是最容易污染的PCR

PCR的应用？

传统上，PCR的应用包括：

侦测DNA序列变异，像变异红血球，地中海型贫血，致癌基因等；

可以简易地测知染色体的重新组合是否发生或是否有移位；

可以利用已经复制过的目标DNA将基因体DNA，直接进行纯种系的次选殖，不仅可以省略繁复的选殖步骤里面挑选目标纯种系的艰巨工作，同时也可能让我们避开保存基因体重的繁杂工程；

能够借PCR产生足够的DNA，轻易地做直接序列测试；

可以让我们很灵敏地侦测病毒或病原的存在；

利用高度保存的序列作引子，也可以复制多样性的基因，在法医学上或亲子鉴定的应用，非常有帮助；

促进检验的灵敏度，这是PCR最有价值的地方。像痰等含复杂物甚多的检体因能够轻易的处置净化而不再是不受欢迎的检体。像由一根头发也能将所含的基因有效的复制放大来分析DNA，像病理科所保存的石腊标本块，也能应用PCR来作分析，对于古代木乃伊检体，甚至化石或冰封的古代生物的DNA，也能作PCR使绝种的古生物的DNA能够被序列出来。

当然，在性别决定的用途上，聚合酶链反应可以大量衍生出Y染色体探针作为细胞染色体分析所用。

这一项科技同时也可更早期侦测出胎儿遗传性疾病。其最大好处是不会侵犯到胚胎或胎儿，免除了流产、早产的危险。不过，欲将之应用到临床产前诊断，必须先克服如轻易分离出滋养层母细胞及辨别其是否为前次妊娠残留的滋养母细胞等难题。

PCR原理

PCR原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链。

在实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，加入设计引物，DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。

PCR基因扩增原理

将待扩增的模板DNA变性使之成为单链，DNA样品中，特异性的引物能够与其互补的序列杂交，在脱氧核苷三磷酸和Taq酶存在时，就可以合成模板 DNA的互补链，反应完成后，将反应混合物加热使DNA双链变性，温度下降后，过量的引物又可以开始第二轮的合成反应。这种延伸，变性，退火，延伸的循环可以重复多次，使所需要的DNA片段得到特异性的扩增。

pcr技术原理

pcr技术原理：DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链，在DNA聚合酶的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。

在实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，加入设计引物，DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。

荧光定量PCR技术原理及利用？

• 荧光定量PCR技术原理及利用？
• 我们实验室曾经通过荧光定量PCR的熔解曲线来检测过SNP，单碱基的变异也会影响熔解温度的，不过对仪器要求很高，好像是罗氏的480 探针的话你也只可能检测那一段的位置，如果你换了其他的突变你还是检测不出啊